- 中科院研发细菌生物传感器,快速检测砷污染物
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文章来源:北极星节能环保网
中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所环境毒理与生态研究室研究员吴李君课题组在细菌生物传感器对水环境中砷的快速检测方面取得新进展。研究针对砷这一危害较大的环境污染物,通过定向进化技术构建更加灵敏高效的砷的细菌生物传感器,实现了方便易行、低成本的快速检测。项目组成员利用带有绿色荧光蛋白的报告载体,以砷诱导型启动子为起始材料,利用易错PCR和DNA重组技术获得启动子突变文库。通过基于流式细胞仪的荧光激活细胞分选(FACS)筛选手段,定向进化得到灵敏、专一、高效的砷诱导型启动子,从而构建更加灵敏高效的砷的细菌生物传感器。
研究结果显示:进化后的砷的细菌生物传感器ep3,其相对诱导活性比野生型提高了12倍,并且对砷的响应时间缩短了一倍,可在45分钟内获得良好的荧光响应;在实际诱导操作中,进化后的砷细菌生物传感器可使用平台期菌作为出发菌,较之传统的诱导操作选用对数期菌减少了2~3小时的前期准备时间,使其在实际检测中操作更加便捷;面对复杂水环境中的离子等干扰时,进化后的砷细菌生物传感器的生长和荧光响应都没有出现明显的异常,表明其在实际复杂水环境检测中具有一定的抗干扰能力;进化后的砷细菌生物传感器对砷污染的内蒙古井水进行检测结果,和电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)方法检测结果非常接近,说明该生物传感器可成功地作为一种新型、简便、廉价的环境砷的检测方法。该项目受到国家重大研究计划、中科院先导专项B,以及研究院院长基金资助。
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